摘要：環(huán)境內(nèi)分泌干擾物（EDCs）是由于人類活動(dòng)而釋放到環(huán)境中的、能影響和擾亂生物內(nèi)分泌系統(tǒng)的有害化學(xué)物質(zhì)的總稱，因具有廣泛的雌激素效應(yīng)而成為當(dāng)前環(huán)境科學(xué)研究的熱點(diǎn)問題。因人類生產(chǎn)活動(dòng)造成的各類殘留或排放是其進(jìn)入環(huán)境的主要途徑。EDCs主要可分為烷基酚類、有機(jī)氯化合物類、鄰苯二甲酯類(PAEs)、多氯聯(lián)苯類和重金屬類等。EDCs能引起生殖異常、免疫抑制等多種毒性效應(yīng)，且能沿食物鏈或在親子之間累積傳遞。我國(guó)各監(jiān)測(cè)水體、土壤及沉積物、空氣中均有EDCs類物質(zhì)檢出，且部分已超過相應(yīng)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)低限，風(fēng)險(xiǎn)不容忽視。傳統(tǒng)的復(fù)雜、高毒樣品預(yù)處理辦法已逐漸被固相萃取等高效低毒的新興處理技術(shù)所代替；其分析手段除發(fā)展較為成熟的液相色譜、質(zhì)譜等化學(xué)方法外，生物學(xué)方法、細(xì)胞學(xué)方法、生物化學(xué)法和分子生物學(xué)方法等非化學(xué)方法也有一定的進(jìn)展。
　　
　　關(guān)鍵詞：環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，分類，毒理作用，環(huán)境分布，分析方法
　　
　　1前言
　　內(nèi)分泌干擾物,是一類外源性化合物，干擾生物體內(nèi)平衡和發(fā)育過程正常激素的產(chǎn)生、釋放、轉(zhuǎn)移、代謝、結(jié)合、反應(yīng)和消除，影響到包括人體在內(nèi)的各種生物的生殖功能、生殖器、腫瘤免疫力并引起各種生理異常。內(nèi)分泌干擾物進(jìn)入環(huán)境后成為環(huán)境內(nèi)分泌干擾物（EDCs），也被稱為環(huán)境激素(Environmentalhormones)。EDCs是由于人類活動(dòng)而釋放到環(huán)境中的、能影響和擾亂生物內(nèi)分泌系統(tǒng)的有害化學(xué)物質(zhì)的總稱。目前已被證實(shí)約有6070種化學(xué)物質(zhì)顯示內(nèi)分泌干擾屬性，EDCs已經(jīng)成為威脅人類健康的大問題之一。通過對(duì)野生生物和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的研究，證實(shí)了許多化學(xué)物質(zhì)的環(huán)境激素作用，因此對(duì)EDCs的研究成為世界各國(guó)環(huán)境科學(xué)家研究的熱點(diǎn)。
　　2EDCs的來源、分類和特點(diǎn)
　　環(huán)境內(nèi)分泌干擾物部分來自自然釋放的植物雌激素，但更多的是人為排放，如農(nóng)藥生產(chǎn)、化學(xué)工業(yè)合成、石油煉制等過程。EDCs進(jìn)入環(huán)境，主要分布于空氣、水、食品和土壤中�？諝庵械腅DCs主要來源于焚燒垃圾、原料泄漏、建筑材料和日用品的揮發(fā)物，水中的EDCs主要來自于工業(yè)廢水，生活污水以及大氣中EDCs的濕沉降；食品中的EDCs主要來自于農(nóng)作物種植管理和生產(chǎn)中使用的農(nóng)藥以及食品添加劑、保鮮劑、防腐劑、著色劑和其它一些化學(xué)物質(zhì)；還有一部分EDCs來源于日常生活中使用的塑料制品，土壤中的EDCs主要來源于工農(nóng)業(yè)活動(dòng)和人類其他社會(huì)活動(dòng)。
　　目前，有環(huán)境內(nèi)分泌干擾效應(yīng)的環(huán)境化學(xué)污染物主要有以下五大類[1]:
　　①烷基酚類，以壬基酚、辛基酚、雙酚A等為代表，主要來源于非離子表面活性劑烷基酚聚氧乙烯醚的生產(chǎn)和降解。大部分烷基酚聚氧乙烯醚本身沒有內(nèi)分泌干擾活性，但其在處理污物時(shí)或在環(huán)境中降解后，能釋放具有內(nèi)分泌干擾活性烷基酚類化合物。這類物質(zhì)有較高的內(nèi)分泌干擾活性，而且污染廣泛。
　�、谟袡C(jī)氯化合物，如DDT、十氯酮、狄氏劑等有機(jī)氯殺蟲劑，這些殘留的有機(jī)氯化合物能持久存在于環(huán)境中、在生物體內(nèi)富集、通過氣、水和生物傳輸并在陸地和水生生態(tài)系統(tǒng)中累積，具有持久污染和內(nèi)分泌干擾特性，對(duì)人類健康和環(huán)境具有顯著危害；另外垃圾焚燒產(chǎn)物和氯處理后的自來水都被發(fā)現(xiàn)含有有機(jī)氯內(nèi)分泌干擾活性物質(zhì)。高效、低毒、低殘留的擬除蟲菊醋類殺蟲劑也被發(fā)現(xiàn)有內(nèi)分泌干擾活性。
　�、坂彵蕉�甲酯��(PAEs)，是塑料制品的主要原料，可用作聚氯乙烯、氯乙烯共聚物、纖維素樹脂、天然橡膠和合成橡膠的增塑劑、軟化劑和添加劑，這類物質(zhì)可造成大氣、土壤、水體的嚴(yán)重污染，已成為全球性的污染物。
　�、芏嗦嚷�(lián)苯，是人工合成的有機(jī)氯化物，作為穩(wěn)定劑廣泛用于潤(rùn)滑油、絕緣油、增塑劑、熱載體、油漆、油墨等，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，在機(jī)體內(nèi)有很強(qiáng)的蓄積性，并通過食物鏈逐漸被富集，是難降解、難代謝脂溶性環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。
　�、菽承┲亟饘僖灿袃�(nèi)分泌干擾作用，主要對(duì)人類雌激素有拮抗作用，如四乙基鉛常用于含鉛汽油中作防爆添加劑，具有很強(qiáng)的生殖毒性，能影響雌激素對(duì)成熟前期小鼠子宮各型細(xì)胞的作用;鎳可使大鼠孕酮分泌指標(biāo)下降。
　　環(huán)境內(nèi)分泌干擾物具有親脂性、不易降解、易揮發(fā)、殘留期長(zhǎng)等特點(diǎn)，可通過生物富集和食物鏈的放大作用在體內(nèi)富集，并且其對(duì)動(dòng)物或人類的影響有滯后性，可產(chǎn)生轉(zhuǎn)代影響，處于孕期、幼年期的動(dòng)物及人體更易受到EDCs的影響。
　　3內(nèi)分泌干擾物對(duì)生物體的毒理作用
　　內(nèi)分泌干擾物的生物毒理研究起源于20世紀(jì)70年代，主要研究口服雌激素對(duì)人體的藥理副作用，近年來有關(guān)環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對(duì)自然生物造成危害的報(bào)道越來越多。以水生生物為例，主要表現(xiàn)為生殖器官、生殖機(jī)能和生殖行為異常。如美國(guó)西部、歐洲、東南亞和日本水域中的腹足類雄性生物雌性化現(xiàn)象;日本多摩川中的雄性鯉魚精巢發(fā)育不全;生活在造紙廢水和污水處理廠出水中的魚類出現(xiàn)性別比例歧化的現(xiàn)象等，如果給動(dòng)物投加環(huán)境內(nèi)分泌干擾物質(zhì)會(huì)使生殖腺、生殖器官畸形，生殖機(jī)能異�；虺霈F(xiàn)惡性腫瘤。內(nèi)分泌干擾物能嚴(yán)重影響和威脅人類和其它生物的繁殖，如辛基酚可影響某些動(dòng)物的生殖發(fā)育功能，硫丹對(duì)睪丸的精子發(fā)生會(huì)產(chǎn)生影響，導(dǎo)致精子細(xì)胞減少、低精子生成量以及精子畸形。內(nèi)分泌干擾物還能影響動(dòng)物行為，并導(dǎo)致其學(xué)習(xí)能力、記憶力、注意力下降，并影響感官功能和精神運(yùn)動(dòng)發(fā)育等。一些環(huán)境激素具有較高的脂溶性，易通過血腦屏障，沉積于腦組織，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生直接的毒性作用，引起機(jī)體出生缺陷和行為異常。研究表明人類接觸多氯聯(lián)苯、二惡英、己烯雌酚、有機(jī)氯殺蟲劑、毒性金屬有機(jī)化合物和某些金屬等可能改變機(jī)體免疫功能，導(dǎo)致免疫抑制或過度反應(yīng)。大量證據(jù)表明內(nèi)分泌干擾物對(duì)生物的生存造成嚴(yán)重的危害，很多疾病和變異的發(fā)生都與其有密切關(guān)系。
　　4 內(nèi)分泌干擾物的環(huán)境分布
　　4.1水體中內(nèi)分泌干擾物分布
　　研究表明，主要海域、江河湖泊中均可檢測(cè)到EDCs污染物，并且有些EDCs污染物超標(biāo)現(xiàn)象比較嚴(yán)重。如表1所示。
　　由表1數(shù)據(jù)可知，渤海鉛、汞超標(biāo)現(xiàn)象嚴(yán)重，濃度分別為第四類海水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)《GB3097-1997》中限值0.05mg/L和0.0005mg/L的652倍和200倍；長(zhǎng)江、閩江、遼河中下游、珠江三角洲、白洋淀、松嫩平原水體以及官?gòu)d水庫(kù)-永定河水系DDTs均檢出，但低于《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB3838-2002）表3集中式生活飲用水地表水源地標(biāo)準(zhǔn)限值1000ng/L；閩江口PCBs低于《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB3838-2002）表3集中式生活飲用水地表水源地標(biāo)準(zhǔn)限值20ng/L；九龍江口PCBs高于標(biāo)準(zhǔn)限值20ng/L約18倍；珠江三角洲壬基酚濃度均低于美國(guó)國(guó)家環(huán)保局(EPA)推薦淡水標(biāo)準(zhǔn)限值6.6μg/L；嘉陵江和長(zhǎng)江重慶段河流壬基酚部分有超標(biāo)現(xiàn)象。

　　表1中國(guó)水體中EDCs污染現(xiàn)狀

　　
　　4．2土壤及沉積物中內(nèi)分泌干擾物分布
　　持久性有機(jī)物、重金屬環(huán)境內(nèi)分泌干擾物等往往強(qiáng)烈地吸附于土壤和沉積物上，不易降解、難以消除[14]。EDCs污染現(xiàn)狀如表2所示。
　　由于我國(guó)沒有沉積物中PCBs的環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)加拿大環(huán)境委員會(huì)制訂的沉積物環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，污染物濃度低于ISQG(interimsedimentqualityguideline)值（淡水沉積物ISQG34.1ng/g(dw)、海洋與河口沉積物ISQG21.5ng/g(dw)），對(duì)暴露的生物體的威脅尚可接受，極少引起生物負(fù)效應(yīng)；污染物濃度介于ISQG和PEL(probableeffectleve1)之間，對(duì)暴露的生物體有潛在威脅，會(huì)偶爾引起生物負(fù)效應(yīng)；污染物濃度高于PEL(（淡水沉積物PEL277ng/g(dw)、海洋與河口沉積物PEL189ng/g(dw)），對(duì)暴露的生物體有嚴(yán)重的或緊急的威脅，會(huì)經(jīng)常引起生物負(fù)效應(yīng)。
　　由表2可知，松花江PCBs平均水平超過淡水沉積物ISQG參考值，其他河流沉積物平均水平均低于淡水沉積物ISQG參考值；珠江口、大連灣PCBs平均水平超過海洋與河口沉積物ISQG參考值，其他河口和海域沉積物平均水平均在相應(yīng)參考值以下。說明松花江、珠江口、大連灣有較嚴(yán)重的PCBs污染，風(fēng)險(xiǎn)不容忽視。
　　土壤中鉛、鎘、汞與《土壤環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB15618-1995）自然背景限值（鉛35mg/kg、鎘0.20mg/kg、汞0.15mg/kg）比較，最大超標(biāo)倍數(shù)分別為5.9、10和1.9，說明重金屬污染較普遍，且因經(jīng)濟(jì)發(fā)展水平不同具有較強(qiáng)的地域性。
　　土壤和河流底泥HCHs、DDTs殘留量高于近海沉積物，近海沉積物中HCHs、DDTs空間分布呈近岸高于遠(yuǎn)岸趨勢(shì)。
　　
　　表2土壤及沉積物中EDCs的污染現(xiàn)狀

　　
　　4．3大氣中EDCs分布
　　大氣中的EDCs多附著于顆粒物上，濃度水平較土壤及水中低，不易獲得監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。我國(guó)空氣中環(huán)境激素分布情況的相關(guān)報(bào)道很少。曾凡剛在北京市不同功能區(qū)氣溶膠樣品中普遍檢出含量較高的鄰苯二甲酸酯類，石景山地區(qū)氣溶膠樣品中檢測(cè)出鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)1.2-228.0ng/m3；而趙振華等對(duì)北京市大氣顆粒物中鄰苯二甲酸脂進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)部分地區(qū)鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)和鄰苯二甲酸二(2-乙基己基)}酯(DEHP)分別為266.0-980.0ng/m3和133.0-223.0ng/m3。盡管兩項(xiàng)研究時(shí)間間隔較大，但濃度水平無顯著差異。李孔壽等對(duì)南平市大氣顆粒物監(jiān)測(cè)結(jié)果表明，南平市大氣己受到了一定程度的鉛污染，質(zhì)量濃度約為0.2μg/m3，污染程度己達(dá)到當(dāng)時(shí)京津等大城市鉛污染的水平。呼和浩特全年的大氣顆粒物上均附有有機(jī)氯農(nóng)藥(HCHs及DDT)殘留，HCHs一般為1.1-0.5ng/m3,DDE殘留量約為0.1ng/m3,且夏季顆粒物上的農(nóng)藥殘留量較高。隨近年來空氣中顆粒物及可吸入顆粒物的比例逐漸增加，導(dǎo)致隨之進(jìn)入人體的環(huán)境激素亦逐年增多，以致危害人體健康。因此，即使空氣中EDCs、的濃度水平較低，仍不能忽視[14]。
　　5內(nèi)分泌干擾物檢測(cè)方法
　　5.1樣品預(yù)處理
　　由于環(huán)境樣品中有毒污染物種類多、成分復(fù)雜、含量低，在污染物濃度低于分析方法檢出限、基體干擾嚴(yán)重的情況下，不能直接測(cè)定，需要預(yù)分離富集進(jìn)行樣品的預(yù)處理。傳統(tǒng)的預(yù)處理如液-液萃取、索氏提取、蒸餾、結(jié)晶、過濾等，具有操作復(fù)雜、處理周期長(zhǎng)、使用大量易揮發(fā)有毒有機(jī)溶劑等缺點(diǎn)，近年來，內(nèi)分泌干擾物樣品預(yù)處理技術(shù)迅速發(fā)展，主要包括固相萃取(SolidPhaseExtraction,SPE)、固相微萃取(SolidPhaseMicroextraction)、分子印跡技術(shù)、超臨界流體萃取(SupercritiealSupercriticalFluidExtraction,SFE)分離法等，各種方法比較如表3。
　　
　　表3分泌干擾物樣品預(yù)處理方法比較
　　Tab3ComparisonofpretreatmentmethodsforEDCsanalysesofenvironmentalsamples
　　預(yù)處理方法 優(yōu)缺點(diǎn) 應(yīng)用范圍
　　固相萃取 分離效率高、選擇性好、重復(fù)性好、有機(jī)溶劑用量少、節(jié)省經(jīng)費(fèi)、使用方便、快速、安全、易與各類檢測(cè)方法聯(lián)用等優(yōu)點(diǎn)。 最常用的樣品前處理手段。
　　固相微萃取 保留固相萃取的優(yōu)點(diǎn)外，還具有不需使用有機(jī)溶劑，不需要柱填充劑的優(yōu)點(diǎn)。 液體、固體和氣體樣品的預(yù)處理，尤其適合于痕量環(huán)境污染物和生物樣品的分析。
　　分子印跡技術(shù) 集高分子合成、分子設(shè)計(jì)、分子識(shí)別、仿生生物工程等眾多學(xué)科優(yōu)勢(shì)發(fā)展起來的一門邊緣學(xué)科分支，具有與天然抗體同樣的識(shí)別性能和與高分子同樣的抗腐蝕性能的雙重優(yōu)點(diǎn)。 各種不同基體如環(huán)境水和土壤、食物、植物、煙草等樣品的預(yù)處理中。
　　超臨界流體萃取分離法 采用CO2作為萃取溶劑，本身無毒，是一種比較清潔理想的樣品前處理技術(shù)，但由于裝置復(fù)雜、成本高，難于推廣。 用于復(fù)雜樣品基體中殺蟲劑、多氯聯(lián)苯、多環(huán)芳烴等的萃取。
　　
　　5.2分析方法
　　環(huán)境激素類污染物目前最常用的檢測(cè)方法為氣相色譜法(GasChromatography,GC)、液相色譜法(LiquidChromatography,LC)及一些與之相關(guān)的聯(lián)用技術(shù)如氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)和液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)、毛細(xì)管電泳技術(shù)、熒光法及熒光分子傳感法等化學(xué)分析方法。此外，還有生物學(xué)方法、細(xì)胞學(xué)方法，生物化學(xué)法和分子生物學(xué)等其它的方法。
　　5.2.1化學(xué)分析方法
　　（1）氣相色譜(GC)
　　GC法是最常用的測(cè)定環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的方法，與多種預(yù)處理方法結(jié)合，可用于多種環(huán)境樣品的分析。如采用索氏萃取預(yù)處理，再用GC-ECD(電子捕獲檢測(cè))法對(duì)海底沉積物中分泌干擾物進(jìn)行分析，壬基苯酚檢出限為89.1ng/g、辛基苯酚為4.61ng/g[35]。該法定性準(zhǔn)確、定量良好，具有較好的回收率，可以應(yīng)用于上壤、沉淀物、水樣、油樣等環(huán)境樣品中多氯聯(lián)苯類化合物的測(cè)定。
　　氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)法，結(jié)合了GC、MS的兩者之長(zhǎng)，定性能力強(qiáng)，靈敏度高，選擇性好，能檢測(cè)種類繁多的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。液相微萃取預(yù)處理，用GC-MS法檢測(cè)河水中雙酚A，線性范圍為10-10000pg/mL，檢出限達(dá)2pg/mL，回收率在98.3%一104.1%；固相微萃取預(yù)處理和GC-MS法檢測(cè)牛奶中的鄰苯二甲酸酯，檢出限可達(dá)0.31-3.3ng/g；固相萃取預(yù)處理和GC-MS相結(jié)合分析污水處理廠出水中雙酚A，檢出限可達(dá)0.1μg/L，回收率在95-104%之間。近年來，高分辨氣相色譜一高分辨質(zhì)譜(HRGC-HRMS)法由于其高選擇性、高分辨率及高靈敏度的特點(diǎn)，己發(fā)展成為國(guó)際公認(rèn)的PCDD/Fs的標(biāo)準(zhǔn)分析方法，其檢出限可達(dá)到pg級(jí)，廣泛應(yīng)用于環(huán)境樣品的分析。
　　（2）高效液相色譜(HPLC)
　　環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的測(cè)定HPLC法具有靈敏度高，選擇性好，尤其適用于難氣化的有機(jī)物的分析，但不能鑒定出分析物的結(jié)構(gòu)。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)具有良好的靈敏度和選擇性，能直接確定結(jié)構(gòu)、簡(jiǎn)化樣品預(yù)處理過程等特點(diǎn)，但儀器昂貴，測(cè)試費(fèi)用和專業(yè)技能要求高。分子印跡聚合物萃取預(yù)處理，采用HPLC法檢測(cè)水樣中BPA，線性范圍0.1-100nmo1/L，檢出限0.lnmol/L，回收率達(dá)96-101.8%；固相萃取和LC-FLD法分析污水處理廠污水中BPA，檢出限15ng/L,，回收率99-105%；固相萃取預(yù)處理，采用反相HPLC-MS法檢測(cè)河泥中BPA，檢出限0.15ng/g，回收率70-05%；固相萃取預(yù)處理，聯(lián)用LC-MS法檢測(cè)海水中內(nèi)分泌干擾物BPA，辛基苯酚，壬基苯酚的檢出限分別為0.04ng/L、0.14ng/L、0.12ng/L；采用在線預(yù)富集和HPLC-MS聯(lián)用，檢測(cè)尿樣中的16種鄰苯二甲酸酯，檢出限在0.11-0.90ng/mL之間，回收率接近100%。
　�。�3）其他化學(xué)分析方法
　�、倜���(xì)管電泳技術(shù)
　　該法具有高分離能力，以環(huán)糊精改性的膠束電動(dòng)色譜毛細(xì)管電泳技術(shù)能增強(qiáng)分析物的選擇性，減少分析時(shí)間。采用膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜法同時(shí)分離測(cè)定環(huán)境水中5種鄰苯二甲酸酯的標(biāo)準(zhǔn)混合物，30min內(nèi)5種鄰苯二甲酸酯得到了較好的分離，在4-50mg/L的濃度范圍內(nèi)，鄰苯二甲酸丁芐酯的標(biāo)準(zhǔn)曲線具有良好的線性相關(guān)性，工業(yè)廢水加標(biāo)測(cè)定，回收率可達(dá)104%-109%。
　�、跓晒夥�及熒光分子傳感��
　　目前熒光法及熒光分子傳感法已經(jīng)成功應(yīng)用于環(huán)境內(nèi)分泌干擾物測(cè)定，經(jīng)研究證實(shí)，其選擇性、重現(xiàn)性、可逆性及壽命較好。如利用熒光法測(cè)定水中殘留的雙酚A，線性范圍為0.4-300μg/L，檢出限為0.020μg/L；檢測(cè)環(huán)境樣品中的PAEs，線性范圍5.03×10-7-1.01×10-5mol/L，檢出限為8.3×10-8mol/L。
　　5.2.2生物學(xué)方法
　　子宮生長(zhǎng)試驗(yàn)是最經(jīng)典的生物學(xué)方法。選用未成熟的小鼠或大鼠，或用手術(shù)方法去除卵巢，再給子受試物，以給藥前后子宮濕重和子宮濕重與體重之比的變化為指標(biāo)，通過測(cè)定外源性雌激素對(duì)動(dòng)物是否具有促進(jìn)子宮生長(zhǎng)的作用來評(píng)價(jià)其雌激素樣活性。如采用體內(nèi)小鼠子宮增重方法，檢測(cè)苯二甲酸丁基芐酯內(nèi)分泌干擾物在非常安全的劑量下就已經(jīng)顯示雌激素活性。辛基酚可使大鼠子宮濕重、子宮內(nèi)皮細(xì)胞厚度、子宮腺數(shù)量明顯增加，具有明顯的內(nèi)分泌干擾活性。
　　該法優(yōu)點(diǎn)是可作為整體實(shí)驗(yàn)，經(jīng)濟(jì)、方便，但不夠靈敏，影響因素較多，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果外推到人時(shí)有很大難度[1]。
　　5.2.3細(xì)胞學(xué)方法
　　最常用的是由Soto教授建立的E-screen法，其基本原理主要基于人血清中存在著一種抑制雌激素敏感細(xì)胞增殖的特異性物質(zhì)，雌激素可中和特異性物質(zhì)，清除其抑制效應(yīng)，從而誘導(dǎo)細(xì)胞增殖。該法所用細(xì)胞來源于人，排除了由動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外推到人的不肯定性，其結(jié)果能可靠地預(yù)測(cè)內(nèi)分泌干擾物對(duì)人體健康的影響，其敏感性較高、簡(jiǎn)單易行，不僅可以檢測(cè)多種外源性雌激素，而且可用于檢測(cè)存在于泥上，水、人、或動(dòng)物食物中的具有雌激素活性的外源化合物。但該法細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)條件要求較高，而且會(huì)因?yàn)椴煌��?xì)胞株對(duì)雌激素的敏感性，培養(yǎng)條件、所用血清等的不同，檢測(cè)結(jié)果會(huì)相差較大[1]。
　　5.2.4生物化學(xué)法
　　生物化學(xué)方法主要有過氧化物酶活力測(cè)定法，由于子宮中的過氧化物酶對(duì)環(huán)境雌激素有特異性應(yīng)答，子宮重量和過氧化物酶活性有顯著相關(guān)性，通過細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和特異性蛋白含量測(cè)定來判斷受試物的雌激素活性及強(qiáng)度。但由于過氧化物酶常溫下易失活，且酶活性會(huì)隨時(shí)間的延長(zhǎng)而下降，因此操作須在低溫下進(jìn)行，且應(yīng)盡快并同時(shí)進(jìn)行測(cè)定[1]。
　　5.2.5分子生物學(xué)方法
　　將人ER基因雌激素應(yīng)答表達(dá)質(zhì)粒和編碼β-半乳糖苷酶的LacZ基因轉(zhuǎn)染入酵母，前兩者組成雌激素受體反應(yīng)單位，調(diào)節(jié)LacZ的表達(dá)，通過半乳糖苷酶的化學(xué)作用判斷外來物質(zhì)的雌激素活性。許多生物技術(shù)雖然己經(jīng)介入EDCs的環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域，但要發(fā)展為成熟穩(wěn)定、系統(tǒng)規(guī)范、便捷實(shí)用的檢測(cè)方法，仍需進(jìn)行大量的研究工作子以完善[1]。
　　
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