摘要：目的研究非布司他主要雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)和產(chǎn)生的原因。方法和結(jié)果 用HPLC法分離該雜質(zhì)，用波譜法推導(dǎo)其結(jié)構(gòu)，再用合成制備對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。結(jié)論 該雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)為2一(3一羥基亞胺甲基4.異丁氧苯基).4一甲基噻唑_5一羧酸。

　　關(guān)鍵詞：新中醫(yī)雜志 非布司他;雜質(zhì);分離;合成;鑒定

　　非布司他(Febuxostat，1)化學(xué)名為2.(3-氰基4一異丁氧苯基)-4一甲基噻唑_5一羧酸，該藥于2004年初在日本申請上市，隨后分別在美國、歐洲上市，是一種新型的非嘌呤類黃嘌呤氧化還原酶(XOR)抑制劑，其對(duì)XOR具有高度選擇性，并對(duì)氧化型和還原型的XOR均具有顯著的抑制作用，臨床上用于治療尿酸過高癥(痛風(fēng))。

　　在對(duì)非布司他產(chǎn)品的液相色譜分析中，發(fā)現(xiàn)一個(gè)主要雜質(zhì)峰，其保留時(shí)間t =4.8 min。用HPLC制備柱分離得到該雜質(zhì)純品，用MS分析該雜質(zhì)，其準(zhǔn)分子離子峰[M+H] 為335(m/z)，比化合物I的相對(duì)分子質(zhì)量多18，其二級(jí)質(zhì)譜的主要碎片有m/z 318(M一17)、m/z 279(M-56)、m/z 262(M-56一l7)，分別為分子脫羥基、脫異丁基和脫異丁基后再脫羥基的碎片離子峰。

　　為確證該雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)，采用制備液相色譜富集該雜質(zhì)，經(jīng)IR、1 HNMR、”CNMR及DEPT譜分析，發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)與產(chǎn)品的紅外圖譜中明顯的區(qū)別是雜質(zhì)紅外圖譜中未出現(xiàn)氰基峰;雜質(zhì) H—NMR譜在低場除羧酸質(zhì)子的寬峰外，多出一活潑質(zhì)子的的銳鋒(11.448 ppm)，重水交換后此峰消失;而伯酰胺氮質(zhì)子通常為很寬的共振峰(5～8.5 ppm)，且積分面積應(yīng)為兩個(gè)H。由此判斷，化學(xué)位移11.48 ppm應(yīng)為肟的質(zhì)子;雜質(zhì)的”CNMR及DEPT譜可見，雜質(zhì)含7個(gè)季碳，而僅有結(jié)構(gòu)Ⅲ含7個(gè)季碳(結(jié)構(gòu)II含8個(gè)季碳)。綜合判斷認(rèn)為雜質(zhì)結(jié)構(gòu)與化合物Ⅲ基本相符，因而初步判斷非布司他中的主要雜質(zhì)為2一(3.羥基亞胺甲基4_異丁氧苯基)4-甲基_5-噻唑羧酸(Ⅲ)。

　　為進(jìn)一步確證該雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)，筆者嘗試合成該雜質(zhì)。由非布司他的合成路線分析得出，此雜質(zhì)的產(chǎn)生是由于中間體A制備中間體B過程中，醛基被鹽酸羥胺親核加成生成了肟(A—B的中間態(tài))，肟再脫水生成B，可能由于脫水不完全，殘留的肟在最后制備終產(chǎn)品非布司他水解時(shí)生成了雜質(zhì)化合物Ⅲ，見圖2。為此設(shè)計(jì)合成方法如下：分離中間體B粗品中殘留的肟，經(jīng)水解得到化合物Ⅲ。

　　1 儀器與試劑

　　Finnigan Surveyor—LCQ Advantage離子阱液質(zhì)聯(lián)用儀，并聯(lián)PDA;Bruker Am-50OMHz超導(dǎo)核磁共振儀;中間體B(合肥醫(yī)工醫(yī)藥有限公司)。

　　2 合成

　　2.1 肟的分離制備取中間體B用無水乙醇進(jìn)行重結(jié)晶，重結(jié)晶過濾的母液濃縮至干，得淡黃色固體粉末，將粉末上柱分離，用乙酸乙酯：石油醚(1：12)洗脫，收集群=0.55(展開劑：

　　乙酸乙酯：石油醚3：10中間體BR，=0.63，肟R，=0.55)成分，濃縮至干得中間態(tài)肟。

　　2。2 雜質(zhì)Ⅲ的合成取分離的肟1 g，二氧六環(huán)5 ml，8%氫氧化鈉溶液2.5 ml，回流反應(yīng)1 h，反應(yīng)液濃縮至干，加少量水，用稀鹽酸調(diào)pH到1，出現(xiàn)大量白色固體，過濾烘干，得雜質(zhì)Ⅲ。FrIR(KBr)v：3258，2960，1675，1513，1458，1395，1370，1324，1264，1114，1022em～ ; HNMR(d -DMSO)6：1.005—1.021(6H，d，16、17-CH3)，2.071—2.104(1H，t，15一CH)，2.664 (3H，s，7-CH3)，3.896—3.911(2H，d，14一CH2)，7.186～ 7.208(1H，d，12一CH)，7.932～7.954(1H，d，13-CH)，8.275(1H，s，9一CH)，8.331(1H，s，18-CH)，11.448(1H，s，NOH)，13(1H，w，一CO0H);”CNMR(d6-DMSO)8：17.54(C，)，19.402(C。6 )，28.183(C15)，74.935(C14)，113.806(C12)，122.232(C5)，123.714(C9)，125.424(C8)，129.510(Cl3)，142.948(Cl8)，158.809(C4)，159.969(Cl1)，163.395(C6)，168.334(C2);ESI-MS m/z：335[M+H] 。

　　3 討論

　　將制備的雜質(zhì)Ⅲ與非布司他產(chǎn)品進(jìn)行HPLc分析，發(fā)現(xiàn)雜質(zhì)Ⅲ與非布司他中的主要雜質(zhì)的保留時(shí)間完全吻合，均在4.8 min，二者一致。而且合成的雜質(zhì)Ⅲ與分離得到的雜質(zhì)Ⅲ核磁共振氫譜相符，因此可以斷定非布司他產(chǎn)品中的主要雜質(zhì)即為化合物Ⅲ。

　　由于雜質(zhì)Ⅲ與非布司他結(jié)構(gòu)很相似，很難用精制方法去除，分析其產(chǎn)生的原因，主要是制備中間體B的過程中肟未脫水完全所致，因此必須嚴(yán)格控制中間體B中殘留的肟，通過對(duì)B重結(jié)晶可以有效減少肟的殘留，從而減少終產(chǎn)品中雜質(zhì)Ⅲ的含量，制備得到質(zhì)量優(yōu)良的非布司他。

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