本文是一篇藥學(xué)論文，文章研究在小葉榕葉水提液的分離、濃縮過程中直接應(yīng)用超頻震動膜過濾技術(shù)，對超頻震動膜過濾中不同截留孔徑膜的分離、濃縮效果與醇沉法的效果進(jìn)行了考察和比較。

　　【摘要】：目的 對超頻震動膜過濾和傳統(tǒng)水提醇沉工藝的分離、濃縮效果進(jìn)行考察和比較。方法 在小葉榕葉提取物的分離、純化過程中，以相對除雜質(zhì)率和總黃酮收率為指標(biāo)，對截留孔徑為A、B、C、D的超頻震動膜進(jìn)行試驗(yàn)考察，并與醇沉工藝效果進(jìn)行比較。結(jié)果 截留孔徑為B的膜最適合小葉榕葉有效成分的分離，同時(shí)配合截留孔徑的脫水膜，可使分離、濃縮快捷而連續(xù)地進(jìn)行。結(jié)論 在小葉榕葉的生產(chǎn)工藝中，超頻震動膜過濾法可代替?zhèn)鹘y(tǒng)乙醇沉淀法及加熱濃縮方法。

　　【關(guān)鍵詞】：超頻震動膜過濾,水提醇沉,藥學(xué)論文

　　由于中藥成分復(fù)雜，提取分離時(shí)大多要去除鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)、淀粉、樹脂等大分子雜質(zhì)。常用的提取工藝，如醇沉、蒸餾和萃取等，雜質(zhì)不易除盡，有效成分損失嚴(yán)重，造成藥品質(zhì)量不穩(wěn)定，同時(shí)還消耗大量有機(jī)溶劑，成本高且污染環(huán)境。近年來，膜分離技術(shù)在中藥生產(chǎn)工藝中已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用，如中藥注射劑、中藥口服液、中藥浸膏的制備和中藥有效成分的提取等，都取得了良好的效果[1]。膜分離技術(shù)可以有效地去除雜質(zhì)、保留有效成分，且對環(huán)境無污染，其優(yōu)點(diǎn)十分明顯。但膜分離技術(shù)目前的應(yīng)用基本上還是靜態(tài)過濾方式，膜孔易堵塞，通量會很快減少，特別是有機(jī)膜，污染嚴(yán)重，不易清洗，膜使用壽命短，阻礙了膜分離技術(shù)在中藥生產(chǎn)領(lǐng)域的推廣應(yīng)用[2]。

　　從結(jié)果看，該技術(shù)具有分離濃縮連續(xù)進(jìn)行、工序少、周期短、效率高、成本低、能耗低、安全指數(shù)高、膜不易堵塞、膜的保存和再生工序簡單等特點(diǎn)。

　　1材料與儀器

　　1.1材料

　　小葉榕葉藥材和浸膏(均由廣州白云山制藥廠提供)，蘆丁對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號050923)，其他試劑均為分析純。

　　1.2儀器

　　截留相對分子量為 A、 B、 C、D的有機(jī)薄膜，孔徑A>B>C>D(D為脫水膜)，超頻震動過濾設(shè)備(由廣州偉思過濾亞太技術(shù)有限公司提供)，TU��1810紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器公司)。

　　2實(shí)驗(yàn)方法

　　2.1過濾用樣品液的制備

　　取干燥小葉榕葉置提取罐中，加8倍量水，煮提3次，濾過，合并濾液，濃縮至浸膏(每1 g相當(dāng)于原藥材10 g)。稱取浸膏適量，加水溶解成相當(dāng)于含生藥量為0.1 g/mL的樣品液，備用。

　　2.2含量測定用對照溶液的制備

　　精密稱定干燥恒重后的蘆丁對照品9.3 mg，置25 mL量瓶中，加50%(體積分?jǐn)?shù))乙醇溶解，定容至刻度，得到372 μg/mL對照品貯備溶液，備用。

　　2.3乙醇沉淀樣品液的制備

　　取小葉榕葉浸膏3份，每份100 g，分別置1 000 mL容量瓶中，加熱水100 mL溶解，再加乙醇至含醇量約為70%(體積分?jǐn)?shù))，靜置過夜，過濾除去沉淀物，用少量70%(體積分?jǐn)?shù))乙醇淋洗沉淀，合并濾液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上回收乙醇，濃縮液移置10 L的容器中，加水定容至刻度(相當(dāng)于0.1 g/mL生藥材)，備用。

　　2.4超頻震動過濾實(shí)驗(yàn)

　　取“2.1”項(xiàng)下樣品溶液，濾過(相當(dāng)于200目篩，濾除微粒),留樣500 mL作浸膏原液含量測定用，其余部分裝入儲液槽。調(diào)節(jié)溫度在(35±2)℃，在一定壓強(qiáng)和振幅下，使藥液在超頻震動膜過濾系統(tǒng)中過濾。完成后停機(jī)，取樣，測定大分子物質(zhì)的截留率[3]。超頻震動膜過濾流程簡圖，見圖1。

　　圖1超頻震動膜過濾流程簡圖　略

　　3結(jié) 果

　　3.1過濾通量的考察

　　啟動超頻震動膜過濾系統(tǒng)后，待機(jī)械穩(wěn)定約5～10 min，開始定時(shí)考察通量,每個(gè)孔徑的膜在同樣條件下連續(xù)考察3 d(不清洗)，結(jié)果見圖2-5。

　　圖2-圖5　略

　　由圖可見，對于試驗(yàn)面積的單層膜，A型膜3 h后基本穩(wěn)定在70%，B型膜4 h后穩(wěn)定在65%，C型膜穩(wěn)定在50%左右。而對于脫水膜，前期的通量下降迅速，但隨脫水過程的延續(xù)，下降趨勢逐步減緩，在45 min以后則穩(wěn)定在70%左右。實(shí)驗(yàn)說明震動膜過濾的通量在經(jīng)過一定時(shí)間的平衡后，可以達(dá)到穩(wěn)定的通量。

　　3.2有效成分測定[4]

　　3.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

　　精密量取對照品貯備液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL分別置25 mL量瓶中，加50%(體積分?jǐn)?shù))乙醇至6 mL，加5%亞硝酸鈉1.0 mL，搖勻6 min，加10%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))硝酸鋁1.0 mL，搖勻6 min，加4%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))氫氧化鈉試液10.0 mL，加水至刻度，搖勻，在15 min后500 nm處測吸收度，以吸收度(A)為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度(ρ)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程A=0.011 542ρ+0.005 271,r=0.999 8，表明蘆丁對照品在14.88～89.28 μg范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

　　3.2.2樣品的測定

　　分別精確量取原液、各濾液、乙醇沉淀后樣液1.0 mL按“3.2.1”項(xiàng)下操作，每個(gè)樣品連續(xù)測定5次并記錄吸收值，求均值代入回歸方程計(jì)算總黃酮含量，見表1。

　　表1UV測定結(jié)果(略)

　　3.3重量法測定大分子物質(zhì)(雜質(zhì))去除情況的考察

　　分別精密量取原液、各濾液、乙醇沉淀樣液10.0 mL于小燒杯中，水浴蒸干，然后置80 ℃烘箱中3 h，取出置干燥器中冷卻至室溫，稱重，重復(fù)干燥至恒重，將所得各濾液、乙醇沉淀樣液的重量與原液樣品重量相比，得到相對保留率，然后按公式“相對除雜率=(1-相對保留率樣品)×100%”計(jì)算，即為不同處理方法相對去除大分子雜質(zhì)的量(n=5)，見表2。從表2結(jié)果可知，以原液去除大分子物質(zhì)為0計(jì)，醇沉為19%，A膜48%，B膜58%，C膜68%，脫水膜97%。

　　表2重量法測定結(jié)果(略)

　　4討論

　　4.1本研究旨在比較超頻震動膜濾法與傳統(tǒng)水提醇沉法對小葉榕葉提取物分離、濃縮效果，通過試驗(yàn)找到最佳超頻震動膜過濾條件，使得保留更多有效成分的同時(shí)，去除大量的大分子雜質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)中，A、B型截留孔徑的膜能達(dá)到有效地去除雜質(zhì)、保留小分子成分的目的，效果均優(yōu)于醇沉法，但綜合小葉榕葉提取物總黃酮成分的保留及除雜效果，B型截留孔徑的膜更優(yōu)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果及相關(guān)物料計(jì)算表明，本法可替代小葉榕葉生產(chǎn)工藝中的水提醇沉工藝及加熱濃縮過程，見表3。

　　表3超頻震動膜濾法與醇沉法效果比較　略

　　4.2在靜態(tài)膜分離過程中，常會出現(xiàn)膜堵塞和污染等問題，而超頻震動膜過濾技術(shù)由于高頻震動在膜表面產(chǎn)生的橫向剪切力使大分子物質(zhì)難以在膜表面積聚形成次生膜，藥液經(jīng)簡單預(yù)處理即可進(jìn)行有效的過濾，一般連續(xù)運(yùn)行1周清洗1次即可，而且膜的清洗簡單，膜壽命長[5-7]。靜態(tài)過濾中，有機(jī)膜的使用壽命約為10～30 d，其原因主要來自污染堵塞和反復(fù)清洗;而超頻震動膜過濾中，膜的壽命一般在1～2年。因而在中藥分離、濃縮方法中，該法可以替代有機(jī)膜的靜態(tài)過濾方式。

　　4.3動態(tài)膜濾和靜態(tài)膜濾一樣，膜孔徑和極性決定了膜的分離效果。選擇最適孔徑的膜及膜過濾參數(shù)是關(guān)鍵，適宜截留孔徑的膜能有效地截留雜質(zhì)、保留所需分子量的物質(zhì)。但在實(shí)際中，膜孔徑的選擇并不完全取決于被分離物質(zhì)分子量的大小，常常還受分子帶電性、立體空間構(gòu)型、膜與大分子物質(zhì)的吸附作用、pH值、黏度、溫度等因素的影響[8-9]。這些影響因素將在以后的實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步探討。

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　　《南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)》是全國有影響的綜合性中醫(yī)藥學(xué)術(shù)刊物，1959年創(chuàng)刊，由南京中醫(yī)藥大學(xué)主辦。設(shè)有學(xué)術(shù)探討、臨床研究、方藥研究、針灸推拿、醫(yī)史文獻(xiàn)、臨床報(bào)道、經(jīng)驗(yàn)交流等專欄。本刊系中文核心期刊、中國科技論文統(tǒng)計(jì)源刊、中國科技核心期刊、首屆中國高校優(yōu)秀科技期刊、江蘇省優(yōu)秀期刊、中國科學(xué)引文數(shù)據(jù)庫統(tǒng)計(jì)源期刊、中國學(xué)術(shù)期刊綜合評價(jià)數(shù)據(jù)庫統(tǒng)計(jì)源期刊、中國生物醫(yī)學(xué)光盤數(shù)據(jù)庫統(tǒng)計(jì)源期刊、《中國科技期刊中醫(yī)藥文獻(xiàn)索引》源期刊、《中國醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)》源期刊、美國化學(xué)文摘數(shù)據(jù)庫及其《化學(xué)文摘》(CA)源期刊、俄羅斯《文摘雜志》(AJ)源期刊、波蘭《哥白尼索引》(IC)數(shù)據(jù)庫源期刊。